. PENDAHULUAN
A.
Latar Belakang
Rendahnya produktivitas
tanaman terutama Perkebunan rakyat antara lain disebabkan oleh petani yang
belum memperhatikan budidaya tanaman, agroekosistem dan penerapan Pengendalian
Hama Terpadu ( PHT) pada areal kebunnya, sehingga kerugian hasil akibat
serangan OPT terutama hama
dan penyakit tanaman cukup besar.
Penggunaan
Pestisida sintetis yang kurang bijaksana
dalam pengendalian Organisme Pengganggu Tumbuhan (OPT) masih banyak
digunakan oleh petani perkebunan, hal ini mengakibatkan timbulnya beberapa
masalah yang kurang menguntungkan, diantaranya timbul resistensi OPT terhadap
Pestisida sintetis, residu pestisida, mengakibatkan pencemaran lingkungan dan lain-lain. Oleh karena itu sangatlah
bijaksana apabila dalam pengendalian OPT
dilakukan dengan menggunakan Musuh alami / Agens hayati.
Beberapa jenis Agens hayati yang diketahui efektif untuk
mengendalikan OPT perkebunan dan mudah pengembangannya adalah :
1. Jamur Beauveria bassiana
untuk mengendalikan penggerek buah kopi ( Hypotenemus hampei ) pada tanaman Kopi, Helopeltis
sp pada tanaman Teh dan Kakao, Empoasca sp pada tanaman teh.
2. Jamur Spicaria sp untuk
mengendalikan Helopeltis sp pada tanaman Teh dan Kakao serta
ulat.
3.
Jamur Trichoderma sp. untuk mengendalikan Fusarium
oxysporum (penyebab penyakit busuk batang pada tanaman Vanili), Phytophtora
sp (penyebab penyakit busuk pangkal batang pada tanaman Lada) dan Rigidoporus
lignosus ( penyebab penyakit
Jamur akar putih pada tanaman Karet).
4. Jamur Metarrhizium
anisopliae untuk mengendalikan Oryctes rhinoceros pada tanaman Kelapa dan lain-lain.
5. Jamur Arthrobotrys
sp untuk mengendalikan Nematoda.
6. Jamur Verticillium sp untuk mengendalikan
penyakit bercak daun ( Hemiliea vastratrix )
p ada tanaman
kopi dan cacar daun teh ( Exobasidium vexans)
B. Tujuan
Tujuan pengembangan Agens hayati di Jawa
Barat adalah :
1. Mengembangkan Agens Hayati yang diketahui
efektif untuk mengendalian OPT perkebunan dan mudah dilaksanakan oleh petani
Perkebunan
2. Memperbanyak dan menyebarkan Agens hayati
jenis Jamur Beauveria bassiana, Spicaria sp.,
Trichoderma sp. dan Metarrhizium anisopliae dan Arthrobotrys sp. pada
media beras jagung untuk selanjutnya diaplikasikan di lapangan.
3. Menyediakan dan menerapkan penggunaan Agens
hayati untuk mengen dalikan OPT
Perkebunan di tingkat petani.
C.
Sasaran
Sasaran pengembangan Agens hayati adalah :
1. Tersedianya inokulum jamur sebanyak 2.000 Kg dengan rincian : Beauveria bassiana ( 400 KG ),
Spicaria sp ( 300
Kg ) , Trichoderma sp ( 1.000 Kg), Metarrhizium anisopliae ( 100 Kg ) , Arthrobotrys
sp ( 150 KG ) dan Verticilum sp ( 50 Kg ) . pada
media beras jagung untuk selanjutnya diaplikasikan di lapangan.
2. Terwujudnya penggunaan agens
hayati jenis jamur Beauveria bassiana, Spicaria sp.,
Trichoderma sp., Metarrhizium anisopliae, Arthrobotrys sp dan Verticilum sp .dalam rangka
penerapan PHT OPT perkebunan ditingkat petani.
3.
Terwujudnya penurunan serangan
OPT pada tanaman Perkebunan.
II. PELAKSANAAN KEGIATAN
a. Waktu dan Tempat
Pelaksanaan
pengembangan mulai bulan Maret sampai
dengan bulan Oktober 2007, yang
dilaksanakan di Laboratorium Balai
Proteksi Tanaman Perkebunan Dinas Perkebunan Propinsi Jawa Barat.
b. Bahan dan Alat
:
Bahan yang digunakan dalam kegiatan ini
adalah isolat murni Agens hayati berbagai jenis , PDA/SDA, aquades, spirtus,
alkohol, NaOCl, kertas isap, tissu gulung, alumunium foil, kain kasa, gas
elpiji, plastik, kapas dan lain-lain.
Alat yang digunakan adalah autoclave, box
isolasi, lampu bunsen, mikroskop, glass obyek, glass preparat, petridish,
erlenmeyer, tabung reaksi, disectingset, panci serbaguna, baskom plastik,
timbangan, semprotan kecil, saringan, spidol, hekter, baki plastik, rak
penyimpanan dan lain-lain.
c. Prosedur kerja :
Penyiapan
starter agens hayati di laboratorium
BPTP dilaksanakan melalui proses
sebagai berikut :
§
Explorasi
§
Pemurnian dan identifikasi
§
Perbanyakan starter
Agens Hayati.
§
Uji kualitas :
a.
Jumlah spora
b.
Viabilitas spora
Prosedur
kerja tersebut diatas dapat diuraikan sebagai berikut :
·
Eksplorasi :
Explorasi merupakan langkah awal sebelum melakukan
pengembangan Agens hayati yaitu :
-
Mencari specimen di lapangan
berupa serangga yang diduga terinfeksi jamur dan serangga yang sehat ( tidak terinfeksi
jamur ), bagian tanaman ( daun, akar, batang ) dan tanah di sekeliling tanaman.
-
Specimen yang diperoleh dari
lapangan yang diduga terinfeksi jamur sebelum dimurnikan terlebih dahulu
dilembabkan pada kapas yang dibasahi air dan disimpan pada petridis untuk
ditumbuhkan jamurnya.
·
Pemurnian dan identifikasi:
- Penyiapan bahan dan alat
Alat dan
bahan yang akan digunakan seperti : petridis, tabung reaksi, beker glass,
erlenmeyer, disectingset, mikroskop, autoclave, box isolasi, lampu bunsen,
obyek glass, PDA/SDA, alkohol, spirtus, aquades, kapas, alumuniun foil dan
lain-lain disiapkan.
-
Sterilisasi alat dan tempat
kerja :
Alat-alat dari bahan glass ( petridis,
tabung reaksi, erlenmeyer dan beker
glass ) setelah dicuci bersih disterilkan pada oven dengan temperatur 150 – 200
o C selama 2 jam sedang box
isolasi dibersihkan dengan alkohol, maksudnya agar pengembangan jamur yang
diinginkan tidak terkontaminasi dengan jamur-jamur lain yang tidak diharapkan.
-
Pembuatan Media tumbuh :
v
PDA/SDA ditimbang sesuai dengan kebutuhan, dicampur
aquades dilarutkan/dipanaskan sambil
diaduk – aduk selama ± 45 menit sampai larutan homogen.
v
PDA/SDA diisikan pada tabung – tabung reaksi dan
erlenmeyer kemudian bagian atasnya
disumbat dengan kapas dan alumunium foil selanjutnya disterilkan dengan
autoclave pada temperatur 121 ° C,
tekanan 15 psi dan dikonstankan selama 30 menit.
v
PDA/SDA dikeluarkan dari autoclave. Untuk tabung reaksi
diletakkan posisi miring, dan yang dierlenmeyer
dituangkan pada petridis selanjutnya dibiarkan dingin dan membeku.
- Pembiakan jamur pada media tumbuh.
Serangga hasil explorasi yang sudah
terinfeksi dan tumbuh jamurnya, kemudian didisinfektan terlebih dahulu,
dikeringkan pada kertas hisap steril selanjutnya diisolasikan pada PDA/SDA
steril pada petridis. Pekerjaan ini dilakukan di dalam box isolasi secara
aseptis, kemudian diinkubasikan pada suhu kamar ( suhu 20°- 30° C,
RH 90 %) selama 3-5 hari.
- Identifikasi :
Setelah di media PDA/SDA tumbuh
koloni jamur , selanjutnya diambil
sedikit dengan menggunakan jarum dan diletakkan pada obyek glass,
kemudian diidentifikasi. Jika jamur yang
tumbuh masih bercampur dengan jamur lain, dilakukan pemurnian berulang-ulang
3-5 kali sampai diperoleh isolat murni.
-
Pengembangan Isolat pada media tumbuh :
» Pengembangan pada
media agar di Tabung reaksi.
Jika hasil
identifikasi sudah diyakini kebenarannya, ambil bagian atas jamur dengan
menggunakan jarum ose dan tumbuhkan di media agar di tabung reaksi kemudian
inkubasikan pada suhu kamar. Setiap 1 tabung reaksi isolat dapat
menginokulasi ± ½ Kg media jagung ( 5 kantong plastik).
»
Pengembangan pada media agar di botol.
Pada prinsipnya pembuatan isolat pada
media agar di botol sama dengan pada tabung reaksi hanya bedanya volume PDA
lebih banyak di banding pada tabung reaksi. Setiap 1 botol isolat dapat
menginokulasi ± 4 Kg media jagung ( 40
kantong plastik).
·
Pembuatan starter/ragi Agens hayati :
-
Timbang beras jagung dan dicuci
bersih, selanjutnya dikukus dengan
menggunakan dandang selama 30 menit ( ½ matang ).
-
Hamparkan jagung yang telah
dikukus diatas nampan/baki sampai
dingin. Untuk mempercepat
pendinginan digunakan kipas angin.
-
Masukan masing-masing 100 gram
ke dalam kantong plastik.
-
Hasil kemasan dimasukan lagi
pada kantong plastik kapasitas 5 kg.
-
Selanjutnya disterilkan pada autoclave pada temperatur 121
°C, tekanan 15 psi dan dikonstankan selama 60 menit.
-
Setelah steril angkat dan
didinginkan.
-
Pada media beras jagung yang
steril tersebut dilakukan inokulasi
isolat murni agens hayati dengan
menggunakan jarum ose. Pelaksanaan dilakukan di dalam box isolasi secara aseptis.
-
Selanjutnya plastik dihekter dan
dikocok agar spora jamur dapat tersebar merata pada media jagung.
-
Selanjutnya diinkubasikan pada
suhu kamar selama ± 2
minggu.
-
Starter siap disalurkan digunakan untuk perbanyakan di tingkat petani
·
Uji Kualitas Jamur :
a.
Penghitungan Jumlah Spora
o Menimbang jamur entomopatogen sebanyak 1 gram.
o Memasukan jamur ke dalam blender lalu ditambah aquades sebanyak 100 ml
kemudian dihancurkan untuk mendapat suspensi jamur.
o Menutup ruang hitung Haemacytometer dengan kaca obyek dan meneteskan
suspensi sebanyak 1 cc dengan pipet tetes, sehingga suspensi mengalir ke bawah
kaca obyek dan mengisi ruang hitung.
o Menghitung jumlah spora dalam 5 kotak besar yang masing – masing dilakukan
di bawah mikroskop, penghitungan diulang 2 kali.
o Jumlah spora dicatat dan dihitung dengan rumus :
Jumlah spora = Rata-rata spora x d x 10 6
80 x
0,25
Keterangan : d =
pengencer
80 = jumlah kotak kecil yang dihitung
0, 25 =
kostanta
b. Uji
Viabilitas
Untuk mengetahui daya tumbuh/berkecambahnya spora, maka dilakukan uji viabilitas dengan tahapan
sebagai berikut :
o
Siapkan potongan PDA
ukuran 1 cm x 1 cm dan diletakan pada Petridis.
o
Suspensi jamur dari sisa kualitas jamur selanjutnya
diencerkan supaya kerapatan spora tidak terlalu padat dan dilihat dulu di bawah
mikroskop, bila masih padat di encerkan kembali sampai tingkat kerapatan
betul-betul bisa dihitung.
o
Dengan menggunakan pipet suspensi diteteskan pada PDA yang
sudah dipotong-potong dan diletakan pada glas obyek selanjutnya masukkan obyek
glass pada petridish steril.
o
Selanjutnya inkubasikan selama 10 jam.
o
Setelah 10 jam diamati pertumbuhan spora yang berkecambah
dibawah mikroskop.
o Kemudian dicatat banyaknya spora yang berkecambah setelah 10 jam.
2.2.
Penyebaran /
Penyaluran Agens hayati di tingkat Kelompok tani
Waktu dan tempat pelaksanaan :
Waktu pelaksanaan
dari bulan Maret sampai dengan Desember 2007, dilaksanakan di seluruh Kabupaten/ Kota di Jawa Barat. Jenis agens
untuk masing-masing Kabupaten / Kota disesuaikan dengan jenis OPT yang dominal
didaerah tersebut.
Rencana
Pengembangan Agens Hayati
No
|
Jenis
Agens . H
|
Ttriw.
I
|
Triw.II
|
Triw.III
|
Triw.
IV
|
Jumlah
|
1
|
Trichoderma.sp
|
200
|
200
|
350
|
250
|
1000
|
2
|
B.bassiana
|
75
|
75
|
120
|
130
|
400
|
3
|
Spicaria.sp
|
75
|
50
|
120
|
55
|
300
|
4
|
M.anisopliae
|
25
|
25
|
50
|
-
|
100
|
5
|
A.oligospora
|
25
|
15
|
75
|
35
|
150
|
6
|
Verticillium .sp
|
-
|
15
|
25
|
10
|
50
|
Jumlah
|
400
|
380
|
740
|
480
|
2000
|
Rencana
Penyaluran Agens Hayati
No
|
Kabupaten
|
Bb
|
Sp
|
Ma
|
Tri
|
Ao
|
Verti
|
1
|
Ciamis
|
20
|
20
|
10
|
40
|
10
|
|
2
|
Tasikmalaya
|
30
|
20
|
15
|
40
|
10
|
|
3
|
Majalengka
|
25
|
20
|
-
|
40
|
10
|
|
4
|
Sumedang
|
25
|
20
|
5
|
50
|
10
|
|
5
|
Garut
|
35
|
20
|
5
|
80
|
20
|
10
|
6
|
Purwakarta
|
25
|
20
|
-
|
40
|
10
|
10
|
7
|
Sukabumi
|
20
|
20
|
-
|
100
|
10
|
|
8
|
Cianjur
|
25
|
20
|
-
|
80
|
10
|
|
9
|
Bandung
|
25
|
20
|
-
|
70
|
20
|
20
|
10
|
Bogor
|
10
|
10
|
-
|
40
|
-
|
|
11
|
Subang
|
20
|
20
|
5
|
40
|
-
|
|
12
|
Kuningan
|
30
|
20
|
10
|
40
|
10
|
|
13
|
Cirebon
|
-
|
-
|
10
|
-
|
-
|
|
14
|
Indramayu
|
-
|
-
|
5
|
-
|
-
|
|
15
|
Banjar
|
20
|
15
|
10
|
40
|
-
|
|
16
|
BPTP
|
10
|
5
|
5
|
140
|
-
|
|
Jumlah
|
320
|
250
|
80
|
840
|
120
|
40
|
Keterangan
: Bb = Beauveria bassiana
Sp = Spicaria sp
Ma = Metarhizium anisopliae.
Tri = Trichoderma sp
Ao = Arthrobotrys oligospora
Verti= Verticillium
sp